Neljä loistavaa urheilulajia siirtyvät Sienivaltakuntaan: lentopallo, koripallo, jääkiekko ja polttopallo. Kaikki nämä neljä lajia sisältyvät samalle pelilevykkeelle – täydellinen urheilupelikokoelma Mario-faneille, urheilupelien ystäville sekä kaikille siltä väliltä.
Sienivaltakunnan hahmot kokoontuvat urheilemaan yhdessä aitoon Mario-tyyliin. Vaikka lajien perussäännöt pätevät myös tässä pelissä, jokainen urheilulaji on höystetty maagisilla Mario-mausteilla kuten kolikoilla ja erikoisesineillä, jotka tekevät pelaamisesta entistäkin hauskempaa.
Keräämällä kolikoita voi saada bonuspisteitä. Kun pelaajat saavat pisteen tai korin, he saavat myös kyseisen lisätyn bonuksen.
Pelaajat keräävät erilaisia esineitä kuten kilpikonnankuoria, joita voi käyttää vastustajia vastaan. Esimerkiksi Mini-sienellä voi kutistaa pallon ennen kuin se palautetaan toiselle puolelle lentopalloverkkoa.
Jokaisella hahmolla on oma erikoisliike, jota on lähes mahdotonta pysäyttää. Tällaisia ovat mm. Marion tulipalloliikkeet tai Prinsessa Peachin sydämentäytteiset hyökkäykset.
Pelikentällä useat erilaiset temput pitävät pelaajat varpaisillaan. DK Dock -tasossa lentopallokenttä liukuu jatkuvasti vasemmalta oikealle. Bowser Jr. Blvd -tasossa koripallokentällä on bonusrenkaita, jotka ilmestyvät usein ja ne tarjoavat sekä positiivisia että negatiivisia bonuksia.
Jokaista urheilulajia voi pelata joko yhteistyöpelitilassa tai kisata joukkueina kaksi vastaan kaksi -ottelussa.
